40 BISp Jahrbuch Forschungsförderung 2014 15 Nachweis von Eigenblutdoping Bei der Aufbereitung Stabilisierung sowie der Lagerung des Vollblutes bzw der Erythrozytenkon zentrate reagieren die lebenden Blutzellen auf die veränderten Bedingungen und in direkter Folge ist mit physiologischen Reaktionen auf zelluläre Ebene zu rechnen Mittels molekularbiologischer Methoden auf RNA Ebene können diese physiologischen Veränderungen erfasst quantifiziert und ein Biomarkerset entwickelt werden Um diese Hypothese zu stützen wurde zunächst eine Pilotstudie durchgeführt welche die Veränderungen im Genexpressionsmuster im Speziellen von microRNAs miRNA in Blutbeuteln nach definierter Lagerungszeit erfassen soll 2 Methoden 2 1 Probanden In die Studie wurden 20 gesunde männliche Probanden Höchstalter 35 Jahre gesund sportlich ein geschlossen die durch Randomisierung in zwei gleich große Gruppen von je 10 Probanden aufgeteilt wurden Von Gruppe 1 wurde das Blut der Vollblutspende VBS von 500 ml nach der Leukozytende pletion als VB bei 4 2 C gelagert Die VBS von Gruppe 2 wurde nach der Leukozytendepletion in die Blutprodukte EK und Plasma auf getrennt Die EKs wurden ebenfalls bei 4 2 C gelagert 2 2 Studiendesign Um die natürliche Variation Basislinie des Genexpressionsmusters der Probanden zu erfassen wur den pro Proband drei Blutproben aus dem Arm VB Arm im wöchentlichen Abstand vor der VBS entnommen Eine Woche nach der 3 Blutprobe erfolgte die VBS Sowohl das VB als auch das EK wur den für 10 Wochen bei 4 2 C unter kontrollierten Bedingungen gelagert siehe Abb 1 Direkt nach der Leukozytendepletion bei VB und der Erythrozytenkonzentratherstellung wurden vom VB bzw EK die ersten Proben mit dem PAXgene System PAX von PreAnalytiX Hombrechtikon Schweiz als Triplikate gezogen Nach 1 2 4 6 und 10 Wochen Lagerung wurden ebenfalls Proben in Triplikaten genommen Abb 1 Studiendesign für die Pilotstudie Es wurden 20 Probanden durch Randomisierung in zwei gleich große Gruppen von je 10 Probanden aufgeteilt Das Blut der Gruppe 1 und 2 wurden als VB in CPD Puffer bzw EK in PAGGS M Puffer gelagert Die Proben wurden zu den angegebenen Zeitpunkten als Triplikate mit dem PAXgene System PAX entnommen

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